Analýza glukanů v rostlinných a mikrobiálních vzorcích
Date
Authors
Vít, Radek
ORCID
Advisor
Márová, Ivana
Referee
Němcová, Andrea
Mark
A
Journal Title
Journal ISSN
Volume Title
Publisher
Vysoké učení technické v Brně. Fakulta chemická
Abstract
Předložená diplomová práce se zabývá studiem glukanů u vybraných druhů kvasinek, řas a materiálů rostlinného původu. Kultivace byly prováděny za účelem co nejvyšší produkce glukanů za různých teplotních podmínek a v různých médiích. Pro kultivace kvasinek byly vybrány kmeny Saccharomyces cerevisiae (CCY 6646), Sporidiobolus pararoseus (CCY 19-9-6), Phaffia rhodozyma (CCY 77-1), Rhodotorula glutinis (CCY 20-78-26) a Cystofilobasidium infirmominiatum (CCY 17-18-4). Kvasinka Saccharomyces cerevisiae sloužila jako kontrolní kmen, jelikož je dnes již považována za ověřený zdroj -glukanů. Stanovení -glukanů bylo provedeno pomocí enzymatického kitu K-YBGL Megazyme. Ze zástupců řas byla vybrána Euglena gracilis (CCALA 349), z řad vyšších hub shiitake, hlíva ústřičná, ucho Jidášovo a žampión zahradní, z obilovin pšenice, žito, oves, rýže a ječmen. U zástupců kvasinek byl také stanovován obsah mastných kyselin pomocí GC/FID. Jako nejlepší producent -glukanů byla vyhodnocena Rhodotorula glutinis CCY 20-7-26, která vykazovala nejvyšší produkci biomasy (12-14 g/l) a také poměrně vysoké zastoupení -glukanů (25-30 %) u kultivace při 15 °C v médiu s obsahem kvasničného extraktu v kombinaci se síranem amonným. U mikrořasy Euglena gracilis (CCALA 349) byla prokázána přítomnost -glukanů, stejně tak i ve vzorcích vyšších hub a obilovin.
The aim of the diploma thesis is study of glucans production in selected species of yeasts, algae and plants. Cultivation conditions for yeast strains were performed to gain increased production of glucans under different temperature conditions and in media of different composition. Into the set of tested yeasts species strains Saccharomyces cerevisiae (CCY 6646), Sporidiobolus pararoseus (CCY 19-9-6), Phaffia rhodozyma (CCY 77-1), Rhodotorula glutinis (CCY 20-78-26) and Cystofilobasidium infirmominiatum (CCY 17-18-4) were enrolled. Saccharomyces cerevisiae was cultivated as a control strain because of its verified production of -glucans. -glucans were determinated by the enzyme kit K-YBGL Megazyme. For comparison, algal strain Euglena gracilis (CCALA 349), some species of mushrooms (shiitake, oyster mushroom, garden champignon and Jew’s ear) and cereals (wheat, rye, oats, rice and barley) were analysed too. Further, fatty acid content in the yeast cells was determined by the GC/FID. The best producer of yeast -glucans was R. glutinis CCY 20-7-26, which showed the highest biomass production (12-14 g/l) and also a relatively high amount of -glucans (25-30 %), in cultivation at 15 °C in a medium containing yeast extract in combination with ammonium sulphate. The presence of -glucans has been demonstrated in the microalgae, Euglena gracilis CCALA 349, as well as in samples of higher fungi and cereals.
The aim of the diploma thesis is study of glucans production in selected species of yeasts, algae and plants. Cultivation conditions for yeast strains were performed to gain increased production of glucans under different temperature conditions and in media of different composition. Into the set of tested yeasts species strains Saccharomyces cerevisiae (CCY 6646), Sporidiobolus pararoseus (CCY 19-9-6), Phaffia rhodozyma (CCY 77-1), Rhodotorula glutinis (CCY 20-78-26) and Cystofilobasidium infirmominiatum (CCY 17-18-4) were enrolled. Saccharomyces cerevisiae was cultivated as a control strain because of its verified production of -glucans. -glucans were determinated by the enzyme kit K-YBGL Megazyme. For comparison, algal strain Euglena gracilis (CCALA 349), some species of mushrooms (shiitake, oyster mushroom, garden champignon and Jew’s ear) and cereals (wheat, rye, oats, rice and barley) were analysed too. Further, fatty acid content in the yeast cells was determined by the GC/FID. The best producer of yeast -glucans was R. glutinis CCY 20-7-26, which showed the highest biomass production (12-14 g/l) and also a relatively high amount of -glucans (25-30 %), in cultivation at 15 °C in a medium containing yeast extract in combination with ammonium sulphate. The presence of -glucans has been demonstrated in the microalgae, Euglena gracilis CCALA 349, as well as in samples of higher fungi and cereals.
Description
Citation
VÍT, R. Analýza glukanů v rostlinných a mikrobiálních vzorcích [online]. Brno: Vysoké učení technické v Brně. Fakulta chemická. 2020.
Document type
Document version
Date of access to the full text
Language of document
cs
Study field
Chemie pro medicínské aplikace
Comittee
prof. Ing. Miloslav Pekař, CSc. (předseda)
prof. RNDr. Ivana Márová, CSc. (místopředseda)
doc. Ing. Pavel Diviš, Ph.D. (člen)
doc. Ing. Petr Dzik, Ph.D. (člen)
doc. Ing. Stanislav Obruča, Ph.D. (člen)
prof. RNDr. Zbyněk Zdráhal, Dr. (člen)
Date of acceptance
2020-06-29
Defence
Obhajoba diplomové práce proběhla podle následujícího schématu: prezentace studenta-vyjádření vedoucí/ho-oponentský posudek-reakce na posudek-diskuse s komisí. Student přednesl výborný výtah výsledků své práce, řádně zodpověděl všechny dotazy oponentské i členů komise, pohotově reagoval na připomínky. V diskusi tak student prokázal výbornou schopnost orientace v teoretických i praktických základech problematiky práce. Komise zhodnotila jeho práci celkově jako výbornou.
Dzik: Proč byla růstová křivka řas prezentována jako časová závislost a všechny ostatní v podobě sloupcových grafů?
Diviš: Obsah biomasy byl uveden jako „hmotnost“ a v jednotkách g/l – proč?
Pekař: Je kultivace řas spojena s nějakými technologickými problémy?
Obruča: Jak ovlivňují kultivační podmínky obsah glukanů u jednotlivých producentů?
Jakým způsobem byla provedena optimalizace metodiky při použití enzymatického kitu?
Result of defence
práce byla úspěšně obhájena
Document licence
Standardní licenční smlouva - přístup k plnému textu bez omezení