Stanovení autenticity potravin rostlinného původu pomocí molekulárních metod
Loading...
Date
Authors
ORCID
Advisor
Referee
Mark
A
Journal Title
Journal ISSN
Volume Title
Publisher
Vysoké učení technické v Brně. Fakulta chemická
Abstract
Předložená diplomová práce je zaměřena na stanovení autenticity ovocných výživ určených pro ranou dětskou výživu pomocí molekulárních metod. V experimentální části byla provedena pomocí kitu izolace rostlinné DNA z ovoce (jahoda, meruňka, malina, jablko) a z šesti komerčních výrobků pro děti. Izolovaná DNA byla charakterizována a ověřena metodou PCR s primery specifickými pro rostlinnou rDNA (ITS2). Byly vybrány specifické páry primerů pro amplifikaci DNA z jednoho ovocného druhu. Specifičnost primeru byla hodnocena u čtyřech ovocných druhů. Ke stanovení citlivosti testu multiplex PCR byla použita směs ovocného pyré ze dvou plodů. Aby byla ověřena použitelnost navrhnuté multiplex PCR, bylo analyzováno pomocí této metody šest ovocných komerčních výrobků. Předkládaná metodika detekce ovoce pomoci qPCR a multiplex-qPCR (duplex) zahrnuje takové metodické přístupy, které umožňují diagnostikovat dva druhy ovoce (jahoda-malina, meruňka-jablko) v jedné reakci, čímž snižují ekonomické i časové nároky potřebné pro detekci.
The aim of presented diploma thesis was to determination of authenticity of fruit baby foods for early infant feeding using molecular methods. In the experimental part, isolation kit was used for isolation of plant DNA from fruits (strawberry, apricot, raspberry, apple) and from six commercial fruit products for children. Isolated DNA was characterized and verified using PCR methods with primers specific for plant rDNA (ITS2). Specific primer pairs were designed to amplify DNA for the detection of one fruit species. Primer specificity was assessed with four fruit species. A mixture of fruit puree from the two fruits was used to determine the sensitivity of the multiplex PCR assay. Six commercial fruit products were evaluated to verify the applicability of the multiplex PCR assay. The methodology of molecular detection of fruit DNA by qPCR and multiplex qPCR (duplex) includes approaches, which enable to detect two fruits (strawberry-raspberry, apricot-apple) in one reaction and thus reduces time and money requirements.
The aim of presented diploma thesis was to determination of authenticity of fruit baby foods for early infant feeding using molecular methods. In the experimental part, isolation kit was used for isolation of plant DNA from fruits (strawberry, apricot, raspberry, apple) and from six commercial fruit products for children. Isolated DNA was characterized and verified using PCR methods with primers specific for plant rDNA (ITS2). Specific primer pairs were designed to amplify DNA for the detection of one fruit species. Primer specificity was assessed with four fruit species. A mixture of fruit puree from the two fruits was used to determine the sensitivity of the multiplex PCR assay. Six commercial fruit products were evaluated to verify the applicability of the multiplex PCR assay. The methodology of molecular detection of fruit DNA by qPCR and multiplex qPCR (duplex) includes approaches, which enable to detect two fruits (strawberry-raspberry, apricot-apple) in one reaction and thus reduces time and money requirements.
Description
Keywords
Autenticita potravin, detekce falšování potravin, duplex PCR, HPLC, polyfenoly, flavonoidy, jahoda, meruňka, malina, jablko, ovocná dětská výživa., Food Authenticity and Detection of Food Adulteration, duplex PCR, HPLC, polyphenols, flavonoids, strawberry, apricot, raspberry, apple, fruit baby food.
Citation
PLÁŠKOVÁ, A. Stanovení autenticity potravin rostlinného původu pomocí molekulárních metod [online]. Brno: Vysoké učení technické v Brně. Fakulta chemická. 2020.
Document type
Document version
Date of access to the full text
Language of document
cs
Study field
Chemie pro medicínské aplikace
Comittee
prof. Ing. Miloslav Pekař, CSc. (předseda)
prof. RNDr. Ivana Márová, CSc. (místopředseda)
doc. Ing. Pavel Diviš, Ph.D. (člen)
doc. Ing. Petr Dzik, Ph.D. (člen)
doc. Ing. Stanislav Obruča, Ph.D. (člen)
prof. RNDr. Zbyněk Zdráhal, Dr. (člen)
Date of acceptance
2020-09-03
Defence
Obhajoba proběhla podle následujícího schématu: prezentace studentky-vyjádření vedoucí/ho-oponentský posudek-reakce na posudek-diskuse s komisí. Studentka přednesla výborný výtah výsledků své diplomové práce, řádně zodpověděla všechny dotazy oponentské i členů komise, pohotově reagovala na připomínky. V diskusi tak studentka prokázala výbornou schopnost orientace v teoretických i praktických základech problematiky diplomové práce. Komise zhodnotila její diplomovou práci celkově jako výbornou.
Otázky vznesené během diskuse:
Diviš: Jak hodnotíte použitelnost kalibračních křivek s koeficientem determinance 0,6?
Pekař: Nezkoušela jste multiplexní metodu? Jak dobře se izolovala jablečný amplikon? Jaký způsob extrakce rostlinné DNA jste zvolili?
Result of defence
práce byla úspěšně obhájena
Document licence
Standardní licenční smlouva - přístup k plnému textu bez omezení