WACZULÍKOVÁ, K. Programově řízená lyofilizace k přípravě nosičového systému nativního hyaluronanu a hydrofobních molekul [online]. Brno: Vysoké učení technické v Brně. Fakulta chemická. 2022.

Posudek vedoucího

Enev, Vojtěch

Kristína Waczulíková se ve své diplomové práci zabývala využitím programově řízeného sušení mrazem (lyofilizace) k přípravě nosičových systémů na bázi biokompatibilního a biodegradabilního nosného média se silně hydrofobními sloučeninami prostřednictvím hydrofobních interakci mezi polyelektrolytem hyaluronanu a hydrofobních fluorescenčních sond. Aby bylo možné co nejlépe nastavit proces sušení, tak bylo studentkou prostudováno termodynamické chování roztoků hyaluronanu s ohledem na různou koncentraci ko-rozpouštědla tzn. terc. butylalkoholu. Tento experimentální krok byl zvolen právě proto, aby při nastavení lyofilizačního procesu nedocházelo k vymražení vzorku silně pod kritickou teplotu, která koresponduje s teplotou eutektického bodu či Tg. Tento první experimentální krok byl z časového a experimentálního hlediska resp. náročnosti velmi nákladný a sám o sobě by pokryl značnou část hodinové dotace běžných diplomových prací. Toto tvrzení nabývá všeobecnou platnost, pokud si uvědomíme, jaké experimentální kroky vedou k získání celkového fázového diagramu systému TBA-hyaluronan. Hlavní důraz této diplomové práce byl kladen na návrh a optimalizaci lyofilizačního postupu, který by přednostně vedl k získání finálního produktu o požadovaných vlastnostech tzn. podpora hydrofobních interakcí mezi modelovými molekulami léčiv a hyaluronových řetězců, zachování vhodných morfologických vlastností lyofilizačního koláče bez zjevných kolapsů struktury hyaluronanu, nezbytná úloha sekundárního sušení atd. Neméně důležitou experimentální částí této diplomové práce bylo prostudování vzniklých hydrofobních interakcí mezi těmito komponentami pomocí fluorescenční spektrometrie (steady-state a časově rozlišené fluorescenční spektrometrie). Dále byly experimentální výsledky podpořeny pomocí infračervené spektrometrie, kde se studentka zaměřila na faktické zhodnocení struktury použitých polyelektrolytů, a to z hlediska možné degradace těchto biopolymerů při lyofilizaci a dále k potvrzení přítomnosti fluorescenčních sond ve vzorku hyaluronanu. V průběhu řešení této diplomové práce studentka prokázala experimentální zručnost a samostatnost, kdy k vlastní práci v laboratoři vždy přistupovala pečlivě a zodpovědně. Mimo jiné bych rád zmínil, že v případě návrhu a optimalizace metody sušení mrazem byla studentka schopna velmi dobře řešit některé obtíže, které se během návrhu tohoto postupu vyskytly. Dále studentka projevovala velmi dobou teoretickou orientaci v této problematice, kterou získala především pečlivým studiem odborné literatury, i když dostupných vědeckých prací zabývajících se tímto tématem je i v dnešní době poměrně omezené množství, jelikož programově řízená lyofilizace je poměrně inovativní laboratorní technika. Dále u Kristíny Waczulíkové oceňuji, že se při psaní této diplomové práce nebála samostatně interpretovat naměřená data, ze kterých vyvozovala vždy logické závěry. Konzultací bylo studentkou využíváno v plné míře, a proto měl vedoucí velmi dobrý přehled, jak pokračuje její experimentální činnost v laboratoři, vyhodnocování naměřených dat a v neposlední řadě i sepisování této vysokoškolské práce. Jednou z hlavních devíz této diplomové práce je, že studentka dozajista přispěla k rozvoji programově řízené lyofilizace na naší fakultě, a díky ní lze tuto instrumentální techniku dále aplikovat na rozličná vědní témata. Na tomto místě musím konstatovat, že byly veškeré vytyčené cíle DP studentkou bezezbytku naplněny. Předložená diplomová práce dle názoru vedoucího beze zbytku splnila cíle, které byly vytyčeny v zadání, a proto ji navrhuji ohodnotit stupněm „výborně“ (A).

Posudek oponenta

Sedláček, Petr

Bc. Kristína Waczulíková se v předložené diplomové práci věnuje zhodnocení potenciálu využití řízené lyofilizace při solubilizaci hydrofobních molekul hyaluoranem. Téma práce je velmi zajímavé, s jednoznačným aplikačním přesahem do oblasti vývoje moderních medicínských nosičových systémů s řízeným uvolňováním aktivních látek. Dle mého názoru práce v mnoha ohledech převyšuje standard tohoto typu závěrečné práce - je rozsahově (71 stran textu bez bibliografie a příloh) i informačně bohatá, v rešeršní části studentka pracovala s téměř stovkou kvalitních (převážně časopiseckých) zdrojů. Z hlediska jazykového mohu vytknout snad pouze občasné opakování stejné informace v různých částech textu (především v teoretické části práce), a také několik níže uvedených věcných a formulačních zaškobrtnutí: - Na několika místech se opakuje nadbytečné použití předložky „v“ před výrazem „in vivo“ (např. str. 8). - Str. 15 – autorka uvádí nižší obsah hyaluronanu v pupeční šňůře oproti synoviální kapalině, což neodpovídá uvedeným koncentracím. - Str. 20 – na obr. 8 je chybně označena cytoplasmatická doména enzymu jako cytoplasmatická membrána. Experimentální část práce jednoznačně přinesla řadu velice zajímavých originálních poznatků, ke kterým se vztahují moje otázky a komentáře navržené k diskusi v rámci obhajoby. Jejich vyšší počet nechť je chápán jako výraz zaujetí a zvědavosti oponenta, výběr z něj ponechám na obhajobové komisi. Předloženou diplomovou práci považuji za velmi kvalitní autorské dílo, které jednoznačně přispělo ke stavu poznání v dané problematice a zaslouží si další rozvoj tématiky v rámci navazujícího výzkumu. Práci doporučuji k obhajobě a hodnotím ji stupněm „Výborně (A)“.

eVSKP id 139184