VYDROVÁ, L. Využití separačních metod pro studium biologicky aktivních látek ve vodách [online]. Brno: Vysoké učení technické v Brně. Fakulta chemická. 2011.
Ing. Lucie Vydrová v rámci řešení své disertační práce navázala na výsledky své diplomové práce a pokračovala ve studiu biologicky aktivních látek vyskytujících se ve vodách. Ze skupiny biologicky aktivních látek si zvolila analgetika, která patří mezi nejrozšířenější skupinu léčiv v ČR i ve světě. Pro jejich stanovení používala separační techniky, a to zejména extrakci na tuhou fázi (SPE) pro izolaci analytů z matric, tj. z povrchové a odpadní vody; pro vlastní stanovení potom kapalinovou chromatografii ve spojení s hmotnostní detekcí. Při své práci postupovala velmi samostatně, samostatně si naplánovala i provedla veškeré odběry odpadních a povrchových vod v rámci ČR. Problematika řešená Ing. Lucií Vydrovou byla součástí mezinárodního projektu COST 636. Na základě výsledků svých experimentů byla vybrána a byl ji financován týdenní workshop organizovaný pro studenty doktorských studijních programů z různých zemí participujících na řešení tohoto projektu. V průběhu tohoto workshopu prezentovala výsledky své práce formou přednášky. V rámci programu Erasmus se zúčastnila 5 měsíční stáže ve Skotsku, kde rovněž prováděla své experimenty, tj. sledovala rezidua léčiv v řece Thurso protékající skotskou vrchovinou. Na základě své spolupráce s jinými zahraničními studenty pobývajícími v té době ve Skotsku byla pozvána na studijní pobyt na Taiwan. Tento pobyt jí byl financován z mobilitního fondu VUT v Brně. Rovněž na Taiwanu řešila část své disertační práce a její výsledky z této oblasti jsou v předložené disertační práci uvedeny. V průběhu zpracování své disertace zvládla veškerou laboratorní techniku, kterou pro svá měření používala. Používala zejména extrakci na pevnou fázi pro izolaci sledovaných analytů a pro vlastní stanovení kapalinovou chromatografii s různými detektory. Ve své disertační práci však vesměs prezentuje výsledky z LC/MS. Podílela se nejen na uvedení tohoto přístroje do chodu, ale také na zavedení této metody na pracovišti. Vzhledem k tomu, že patří k výborným pracovníkům v oblasti separačních metod, pomáhala v průběhu svého doktorského studia studentům z Ústavu chemie a technologie ochrany životního prostředí při řešení jejich experimentů. Její schopnosti byly využity zejména při výuce, kde participovala především na výuce Praktik z organické chemie, Praktik z instrumentální a strukturní analýzy a Praktik z environmentální analýzy. Výsledky své práce prezentovala na mnoha konferencích v ČR i v zahraničí. Rovněž byla řešitelkou jednoho projektu FRVŠ, spoluřešitelkou dalšího projektu a spoluřešitelkou projektu COST. Proto mohu konstatovat, že výsledky výzkumné i pedagogické činnosti Ing. Lucie Vydrové jsou přínosem pro obor Chemie a technologie ochrany životního prostředí, v rámci kterého obhajuje svoji disertační práci, ale rovněž pro výzkumnou a edukační činnost na celé FCH VUT v Brně. Brno, 18.1.2011 prof. RNDr. Milada Vávrová, CSc.
Problematika kontaminace odpadních vod různými léčivy je celosvětový problém, studovaný na nejrůznějších úrovních a za použití celé řady separačních a analytických metod. Že se vskutku jedná o globální problematiku lze odhadnout z ca. 6800 odkazů v databázi SciFinder při zadání kombinace termínů "pharmaceuticals" a "wastewater". Řešená problematika disertační práce je tedy zcela aktuální a v souboru studií mapujících dopady působení bioaktivních látek na životní prostředí zaujímá významné místo. Po formální stránce se disertační práce skládá ze 6-ti základních a třech doplňujících kapitol. Po první kapitole Úvod následuje 2. kapitola Analgetika (31 str.), což je de facto nevhodně zvolený název pro Teoretickou část. V této kapitole jsou postupně probírána běžně používaná analgetika: paracetamol, kyselina (salicylová) a acetylsalicylová, profeny, diklofenak, kyselina mefenamová a konečně kofein. Druhou část tvoří krátké pojednání o metodách stanovení analgetik. V části 2.6 Biotransformace léčiv není zmíněna stereoselektivní metabolická inverze, která byla široce studována v souvislosti s metabolismem protizánětlivých COX-inhibitorů typu 2-aryl-propanových kyselin (profenů). Enzymatická inverze méně účinného, po případě neúčinného (R)- na účinný (S)- enantiomer tak zpochybňuje zavádění čistých, avšak podstatně dražších (S)- enantiomerů (např. (S)-naproxenu). Na str. 22 je chybně uvedena syntéza 4-aminofenolu, natriumborohydrid NaBH4 neredukuje aromatické nitroskupiny. Citace z Wikipedie [33] takto názorně demonstruje záludnost přejímání informací z neodborných zdrojů, přičemž správnou informaci lze nalézt hned v odkazu [1]. Na schématu 14 (v práci jako Obr. 14) je prvním krokem chlorace kyseliny benzoové thionylchloridem (ne sulfochlorace) a v předposledním vzorci zjevně schází methylová skupina. Konečně v části 2.12.1.1 Definice (str. 30) schází sumární vzorec, Mr a CASN pro diklofenak. V disertační práci by měla logicky následovat kapitola Cíle disertační práce. Tato kapitola však nejen nenásleduje, ale není obsažena v celé práci. Následující třetí kapitolou je Experimentální část, která na 15-stranách přináší podrobný popis hodnocení environmentální matrice, použitých přístrojů, zařízení, chemikálií a standardů. Nejrozsáhlejší část pak tvoří popis pracovních postupů. Nejrozsáhlejší 4. kapitola Výsledky a diskuze (45 str.) přináší v celkem 14-ti oddílech všechny získané výsledky experimentů v České Republice, Skotsku a na Taiwanu. Jsou popsány optimalizace a kalibrace HPLC a MS měření, optimalizace SPE extrakce, následované výsledky analýz reálných vzorků. Kapitola končí zajímavým srovnáním vlastních výsledků s již publikovanými údaji z geograficky odlišných lokalit. Poslední 5. kapitola Závěr na necelých 3 stranách přináší stručné, avšak konsistentní shrnutí dosažených výsledků, nicméně porovnání s kapitolou Cíle disertační práce není možné Formální kapitola 6. Seznam použitých zdrojů obsahuje celkem 113 odkazů, ze kterých je však 39 (35%) z internetových zdrojů (9 přímo z Wikipedie). Nevhodnost a malá spolehlivost těchto informací je známá (viz výše uvedený příklad) a v odborných textech by se měly vyskytovat jen v odůvodněných případech. Kapitoly 7. Seznam použitých zkratek a symbolů, 8. Seznam příloh a 9. Přílohy doplňují disertační práci. Předložená disertační práci přes uvedené připomínky zcela jednoznačně prokázala schopnost Ing. Vydrové samostatně vědecky pracovat, získávat experimentální výsledky sofistikovanými analytickými metodami a tyto výsledky logicky zpracovávat a kriticky vyhodnotit. Vědecký přínos disertační práce v rámci základního výzkumu je významný a obohacuje doposud známé poznatky. V souladu s článkem 45 (odstavec 3, písmeno a-f) Studijního a zkušebního řádu VUT v Brně disertační práci doporučuji přijmout k obhajobě v oboru Chemie a technologie ochrany životního prostředí.
V předkládané Disertační práci jsou experimentálně hodnoceny látky ze skupiny nesteroidních antiflogistik ve vodách. Ve skupině hodnocených biologicky aktivních látek se objevuje také široce využívané léčivo - kofein ze skupiny centrálních analeptik. Pro detekci a stanovení léčiv studentka optimalizovala metodu HPLC a MS detekcí. Sestrojila kalibrační přímky. Hodnotila výtěžnost SPE extrakce na modelovém vorku vody při různém pH. Experimentální vzorky vody byly odebírány ve třech lokalitách. V ČR, Skotsku a Taiwanu. Ve všech lokalitách studentka optimalizovala metodu pro detekci a stanovení léčiv využívanou v příslušné laboratoři. Stanovila meze detekce a stanovitelnosti. Kapitola výsledky a diskuse obsahuje velké množství odběrů, extrakce a výsledků z měření, které jsou zobrazeny v grafech a v tabulkách. Připomínky: Lze konstatovat, že Disertační práce je sepsána podle obecných doporučených kritérií, Nicméně několik nedostatků, většinou formálního charakteru, lze vytknout: " Historii analgetik končíte rokem 2000. Od té doby se toho hodně změnilo. " Mám pocit, že jste v teoretické části mechanicky opisovala některé skutečnosti bez znalosti podstaty. Např. str. 13 a 14 citace z literatury VŠCHT skript rozdělení antiflogistik s příklady léčivého přípravku. Ani autoři skript, ani Vy jste se nesnažila zjistit, zda opravdu jsou tyto léčivé přípravky registrovány v ČR a Skotsku příp. Taiwanu. Autor skript dle mého názoru čerpal z hodně starých amerických zdrojů. K tomuto bodu se vztahuje dotaz č. 1 " V použité literatuře často citujete Wikipedii. Domnívám se, že tento zdroj informací není právě nejvhodnější pro citování ve vědeckých pracích. Informace o hodnocených léčivech lze najít v relevantnější literatuře. " Celým českým textem prolíná řazení slov jako v anglickém textu, mnohdy na úkor čtivosti, naštěstí ne srozumitelnosti. " V textu jednou požíváte názvosloví kyselina salicylová a v tom samém odstavci salicylát. " Literatura č. 15: rok vydání článku je 2006 nikoliv 2005, jak uvádíte " Citace č. 55 je učební text volně dostupný, tak bych jej citovala jako skripta a ne webovou stránku. Těchto citací je tam více např. 67, 71 Přes uvedené připomínky a doplňující otázky lze konstatovat, že se Disertační práce zabývá velmi zajímavým a aktuálním tématem a splňuje veškeré náležitosti a kriteria, a proto ji DOPORUČUJI k obhajobě.
Disertační práce Ing. Lucie Vydrové se věnuje problematice stopové analýzy vybraných léčiv v povrchových vodách a při čištění odpadních vod. V rámci svého studia využívá metodu vysokoúčinné kapalinové chromatografie s DAD detektorem nebo techniku LC-MS. V teoretické části práce se autorka nejdříve věnuje historii analgetik a jejich rozdělení podle účinku, dále jejich metabolismu a také působení v životním prostředí. Poté následuje podrobný popis vlastností sledovaných léčiv včetně jejich přípravy, indikace a nežádoucích účinků. Podstatnou část textu pak tvoří podrobný popis problematiky odběru vzorků vod, izolace sledovaných analytů pomocí adsorpce na pevný sorbent a popis použitých analytických přístrojů. Během experimentální práce se doktorandka zaměřila především na vlastní izolaci látek z vodné matrice, kdy vyzkoušela celou řadu sorpčních kolonek, a na optimalizaci podmínek chromatografického stanovení. Nalezla vhodné složení mobilní fáze, průběh gradientu, průtok a teplotu kolony. Ve výsledkové části pak autorka prezentuje nalezené obsahy léčiv, na které se zaměřila, a případné zjištěné anomálie vysvětluje v diskusi. Předložená práce řeší velmi náročnou problematiku stanovení nízkých koncentrací organických látek ve složité matrici, kterou lze úspěšně provádět jen s pomocí náročné instrumentální techniky, kterou studentka měla k dispozici a úspěšně zvládla její aplikaci. Hlavním přínosem práce pro obor je příspěvek k řešení problematiky využití separačních metod pro studium biologicky aktivních látek ve vodách. Práce přináší nové poznatky, rozšiřující dosavadní znalosti v této oblasti. Ing. Lucie Vydrová použila pro řešení vhodné metody a prokázala jak odpovídající znalosti vědního oboru, tak schopnost a připravenost k samostatné činnosti v oblasti výzkumu a vývoje. Její disertační práce obsahuje původní i uveřejněné výsledky a vyhovuje požadavkům na udělení vědecké hodnosti. Vzhledem k výše uvedeným skutečnostem doporučuji Komisi pro obhajobu disertační práce ve studijním programu Chemie a technologie ochrany životního prostředí přijmout práci k obhajobě.
eVSKP id 38840