Show simple item record

Identification of selected genes in lactic acid bacteria

dc.contributor.advisorŠpanová, Alenask
dc.contributor.authorKristová, Máriask
dc.date.accessioned2018-10-21T16:34:02Z
dc.date.available2018-10-21T16:34:02Z
dc.date.created2010cs
dc.identifier.citationKRISTOVÁ, M. Identifikace vybraných genů v bakteriích mléčného kvašení se zaměřením na potravinové doplňky [online]. Brno: Vysoké učení technické v Brně. Fakulta chemická. 2010.cs
dc.identifier.other24587cs
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/11012/921
dc.description.abstractBaktérie mliečneho kvasenia sa prirodzene vyskytujú v gastrointektinálnom trakte človeka. Medzi najvýznamnejšie patria rody Lactobacillus a Bifidobacterium, ktoré obsahujú rad probiotických druhov. Probiotické druhy tvoria súčasť doplnkov stravy. Na presnú a rýchlu identifikáciu tohto rodu a jeho druhov sa využívajú DNA amplifikačné metódy. Cieľom tejto práce bola izolácia a purifikácia DNA z vybraných doplnkov stravy pomocou magnetického nosiča P(HEMA-co-GMA), pokrytého karboxylovými skupinami, v prítomnosti PEG 6000 (16%) a NaCl (2 M) (konečné koncentrácie). Na izoláciu boli použité hrubé lyzáty buniek. Zo 4 doplnkov stravy bol pripravený hrubý lyzát buniek pomocou lyzozýmu, SDS a proteinázy K. Bola uskutočnená optimalizácia množstva pridaného lyzozýmu: 6, 9, 10, 15, 20 a 25 mg/ml). Koncentrácia DNA vo vzorkách bola zmeraná spektrofotometricky. Izolovaná DNA bola použitá ako matrica pre PCR, a to pre PCR s univerzálnymi primermi (veľkosť PCR produktu: 466 bp), rodovo špecifickú PCR pre rod Lactobacillus, rod Bifidobacterium a druhovo špecifické PCR pre druh Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus fermentum, pre skupinu Lactobacillus casei/paracasei, pre druh Streptococcus thermophilus, Bifidobacterium longum, Bifidobacterium bifidum a Bifidobacterium infantis. Amplifikované PCR produkty boli preukázané pomocou gélovej agarózovej elektroforézy. Výsledky boli porovnané s údajmi uvedenými výrobcami. Vo všetkých výrobkoch boli preukázané baktérie deklarovaných rodov.sk
dc.description.abstractLactic acid bacteria are natural habitants of human gastrointectinal tract. Among the most important are bacteria of genus Lactobacillus and genus Bifidobacterium that contain a lot of probiotic species. Probiotic species are used as food supplements. This work was focused on DNA separation from crude cell lysates of 4 food supplements using magnetic carrier P(HEMA-co-GMA) covered by carboxyl groups. DNA was reversible adsorbed to the carriers in the presence of PEG 6000 (16%) and NaCl (2 M) (final concentrations) and eluted into TE buffer. Lysis of cells from food supplements was performed by lysozyme, SDS and proteinase K. The amount of lysozyme was optimalized. Concentration of separated DNA was measured by spectrophotometric method. The amount of isolated DNA was suitable for PCR. Isolated DNA was used for PCR with universal primers, PCR specific for genus Lactobacillus and genus Bifidobacterium and for 9 different species-specific PCRs: Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus fermentum, Lactobacillus casei/paracasei, Streptococcus thermophilus, Bifidobacterium longum, Bifidobacterium bifidum and Bifidobacterium infantis. Amplicons were detected by agarose gel electrophoresis (1,8%). It was shown that DNA amplification methods are quick and precise for identification of studied species. The results of bacteria identification were compared with data provided by the manufacturer. In all food supplements, bacteria of genus Lactobacillus and Bifidobacterium were detected. However, only some species provided by manufacturer were identified by PCR in each tablet.en
dc.language.isoskcs
dc.publisherVysoké učení technické v Brně. Fakulta chemickács
dc.rightsStandardní licenční smlouva - přístup k plnému textu bez omezenícs
dc.subjectdoplnky stravysk
dc.subjectprobiotikásk
dc.subjectmagnetický nosičsk
dc.subjectizolácia DNAsk
dc.subjectPCRsk
dc.subjectfood supplementsen
dc.subjectprobioticsen
dc.subjectmagnetic carrieren
dc.subjectDNA isolationen
dc.subjectPCRen
dc.titleIdentifikace vybraných genů v bakteriích mléčného kvašení se zaměřením na potravinové doplňkysk
dc.title.alternativeIdentification of selected genes in lactic acid bacteriaen
dc.typeTextcs
dcterms.dateAccepted2010-06-09cs
dcterms.modified2010-07-12-11:45:10cs
thesis.disciplinePotravinářská chemie a biotechnologiecs
thesis.grantorVysoké učení technické v Brně. Fakulta chemická. Ústav chemie potravin a biotechnologiícs
thesis.levelInženýrskýcs
thesis.nameIng.cs
sync.item.dbid24587en
sync.item.dbtypeZPen
sync.item.insts2020.03.31 18:30:42en
sync.item.modts2020.03.31 13:27:40en
eprints.affiliatedInstitution.facultyFakulta chemickács
dc.contributor.refereeVojtíšková, Mariesk
dc.description.markAcs
dc.type.drivermasterThesisen
dc.type.evskpdiplomová prácecs
but.committeeprof. Ing. Peter Šimko, DrSc. (předseda) doc. Ing. Jiřina Omelková, CSc. (místopředseda) prof. RNDr. Ivana Márová, CSc. (člen) doc. RNDr. Alena Španová, CSc. (člen) doc. Ing. Bohuslav Rittich, CSc. (člen)cs
but.defence1. Diplomantka seznámila členy komise s náplní a cílem diplomové práce. 2. Byly přečteny posudky na diplomovou práci. 3. Diplomantka akceptovala všechny připomínky oponenta a na všechny otázky odpověděla v plné šíři.cs
but.resultpráce byla úspěšně obhájenacs
but.programChemie a technologie potravincs
but.jazykslovenština (Slovak)


Files in this item

Thumbnail
Thumbnail

This item appears in the following Collection(s)

Show simple item record