Kvasinky a víno
Loading...
Date
Authors
ORCID
Advisor
Referee
Mark
A
Journal Title
Journal ISSN
Volume Title
Publisher
Vysoké učení technické v Brně. Fakulta chemická
Abstract
Tato diplomová práce se zabývá identifikací vinných kvasinek izolovaných z bobulí a moštu vinné révy. K izolaci byla použita bílá odrůda vína Sauvignon, které bylo pěstováno a vyráběno podle požadavků ekologického zemědělství. Odebrané vzorky byly zpracovány v laboratoři a pomocí zřeďovací metody byly získány čisté kultury jednotlivých kvasinek. Z těchto čistých kultur byla pomocí komerčního kitu UltraCleanTM Microbial DNA Isolation Kit vyizolována DNA, která byla použita k další analýze. Izolovaná DNA byla naamplifikována metodou PCR, za použití ITS1 a ITS4 primerů. PCR produkty byly detekovány elektroforeticky v agarozovém gelu. Naamplifikované vzorky, následně přečištěné, byly podrobeny restrikční analýze, ke které bylo použito pět restrikčních endonukleáz: HaeIII, HinfI, TaqaI, AluI a MseI. Vzorky po restrikční analýze byly opět elektroforeticky detekovány, vizualizovány pod UV detektorem a porovnány s obrazem štěpení sbírkově zařazených kvasinek. Dále byla srovnána similarita těchto izolátů a to za použití programu BioNumerics, kde jako kritérium podobnosti byly zvoleny Pearsonovy koeficienty a UPGMA klastrová analýza. Výsledkem je potom dendrogram genetické podobnosti izolovaných kvasinek.
This thesis deals with isolation and identification wine yeasts from grapes and must. For analysis was used white wine Sauvignon that was grown and producing after needs ecological agriculture. Remove samples were processed in laboratory and by the help of dilution method were obtained pure culture isolated yeasts. In the following step, by the application of commercial kit UltraCleanTM Microbial DNA Isolation Kit we were able to isolated individual DNA that it was used to the next analysis. Isolated DNA was amplification by PCR method with ITS1 and ITS4 primers. PCR products were detected on agarose gel. Amplification samples were chopped five restriction endonucleases: HaeIII, HinfI, TaqaI, AluI and MseI. Chopped DNA was detected by the same way as PCR products and it was compared with restriction patterns of collection yeasts. In the next step it was compared genetic similarity of isolated yeasts by using BioNumerics software. As a criterion it was used Pearson coefficients and UPGMA clastering analysis. The result is dedrogram of genetics similarity isolated yeasts.
This thesis deals with isolation and identification wine yeasts from grapes and must. For analysis was used white wine Sauvignon that was grown and producing after needs ecological agriculture. Remove samples were processed in laboratory and by the help of dilution method were obtained pure culture isolated yeasts. In the following step, by the application of commercial kit UltraCleanTM Microbial DNA Isolation Kit we were able to isolated individual DNA that it was used to the next analysis. Isolated DNA was amplification by PCR method with ITS1 and ITS4 primers. PCR products were detected on agarose gel. Amplification samples were chopped five restriction endonucleases: HaeIII, HinfI, TaqaI, AluI and MseI. Chopped DNA was detected by the same way as PCR products and it was compared with restriction patterns of collection yeasts. In the next step it was compared genetic similarity of isolated yeasts by using BioNumerics software. As a criterion it was used Pearson coefficients and UPGMA clastering analysis. The result is dedrogram of genetics similarity isolated yeasts.
Description
Citation
PALÍKOVÁ, P. Kvasinky a víno [online]. Brno: Vysoké učení technické v Brně. Fakulta chemická. 2010.
Document type
Document version
Date of access to the full text
Language of document
cs
Study field
Potravinářská chemie a biotechnologie
Comittee
prof. Ing. Peter Šimko, DrSc. (předseda)
doc. Ing. Jiřina Omelková, CSc. (místopředseda)
prof. RNDr. Ivana Márová, CSc. (člen)
doc. RNDr. Alena Španová, CSc. (člen)
doc. Ing. Bohuslav Rittich, CSc. (člen)
Date of acceptance
2010-06-09
Defence
1. Diplomantka seznámila členy komise s náplní a cílem diplomové práce.
2. Byly přečteny posudky na diplomovou práci.
3. Diplomantka akceptovala všechny připomínky oponenta a na všechny otázky odpověděla v plné šíři.
Diskuse
doc Španová: PCR produkty byly nějakým způsobem purifikovány ?
doc Márová: Jsou rozdíly v mikrofloře mezi ekologickým a integrovaným způsobem pěstování ?
doc Rittich: vzdálenost mezi pozemky ?
Result of defence
práce byla úspěšně obhájena
Document licence
Standardní licenční smlouva - přístup k plnému textu bez omezení