Studium metabolismu polyhydroxyalkanoátů u bakterie Rhodospirillum rubrum

Loading...
Thumbnail Image
Date
ORCID
Mark
A
Journal Title
Journal ISSN
Volume Title
Publisher
Vysoké učení technické v Brně. Fakulta chemická
Abstract
Tato bakalářská práce se zabývá studiem metabolismu polyhydroxyalkanoátů (PHA) u bakterie Rhodospirillum rubrum za odlišných podmínek kultivace. Podmínky se lišily v míře aerace (aerobní, anaerobní, mikroaerobní) a v přítomnosti světelného zdroje (světelná kultivace, temnostní kultivace). Nejprve byly navrženy a otestovány různé objemy média pro nejrychlejší a nejvhodnější kultivaci inokula. Následně byly porovnávány kultivace Rhodospirillum rubrum za různých podmínek z hlediska obsahu PHA pomocí plynové chromatografie. Pro lepší charakterizaci růstu a metabolismu bakterií byly kromě plynové chromatografie použity další doplňkové metody, jako například průtoková cytometrie, UV-VIS spektroskopie (transmisní a difúzně transmisní mód). Z hlediska morfologie buněk byla využita fluorescenční mikroskopie a kryo-skenovací elektronová mikroskopie. Dále byla zkoumána schopnost bakterií syntetizovat barevné pigmenty (karotenoidy a bakteriochlorofyl a). Bakterie byly kultivovány na odlišných typech média (tekuté, pevné), barevné pigmenty byly následně extrahovány a byly vypočtena jejich koncentrace. Pro měření barevných pigmentů byla dále použita UV-VIS spektroskopie, Ramanova spektroskopie a infračervená spektroskopie s Fourierovou transformací (FTIR).
This bachelor thesis deals with the study of polyhydroxyalkanoate (PHA) metabolism in Rhodospirillum rubrum under different cultivation conditions. The conditions differed in the aeration rate (aerobic, anaerobic, microaerobic) and in the presence of a light source (light cultivation, dark cultivation). First, different volumes of medium were suggested and tested for the fastest and the most suitable inoculum cultivation. Subsequently, cultures of Rhodospirillum rubrum under different conditions in terms of PHA content were compared by gas chromatography. In addition to gas chromatography, other complementary methods were used for better characterization of bacterial growth and metabolism, such as flow cytometry, UV-VIS spectroscopy (transmission and diffusion transmission modes). Fluorescence microscopy and cryo-scanning electron microscopy were used in terms of cell morphology. Furthermore, the ability of bacteria to synthesize color pigments (carotenoids and bacteriochlorophyll a) was investigated. The bacteria were cultivated on different types of media (liquid, solid), the color pigments were subsequently extracted, and their concentrations were calculated. UV-VIS spectroscopy, Raman spectroscopy and Fourier transform infrared spectroscopy (FTIR) were also used to measure color pigments.
Description
Citation
RUBANOVÁ, B. Studium metabolismu polyhydroxyalkanoátů u bakterie Rhodospirillum rubrum [online]. Brno: Vysoké učení technické v Brně. Fakulta chemická. 2022.
Document type
Document version
Date of access to the full text
Language of document
cs
Study field
Biochemická technologie
Comittee
prof. RNDr. Ivana Márová, CSc. (předseda) doc. Ing. Pavel Diviš, Ph.D. (místopředseda) prof. Ing. Stanislav Obruča, Ph.D. (člen) doc. Ing. Adriána Kovalčík, Ph.D. (člen) doc. Ing. Eva Vítová, Ph.D. (člen) doc. RNDr. Renata Mikulíková, Ph.D. (člen)
Date of acceptance
2022-06-16
Defence
1. Studentka seznámila členy komise s náplní a cílem bakalářské práce. 2. Byly přečteny posudky na bakalářskou práci. 3. Studentka akceptovala všechny připomínky oponenta a na všechny otázky odpověděla v plné šíři. Diskuse: prof. RNDr. Ivana Márová, CSc. Konkuruje produkce vedlejší metabolitů produktu PHA? Jak bylo dosaženo mikroaerobních podmínek? Pigmenty jsou produkovány bakterií za světla nebo za tmy? Mění se morfologie kultury se způsobem kultivace? doc. Ing. Pavel Diviš, Ph.D. V práci uvádíte barvivo BODOPY, víte, o jakou látku se jedná? V práci také uvádíte média pod zkratkami SYN a FAY, můžete tyto zkratky vysvětlit? doc. Ing. Adriána Kovalčík, Ph.D. Kde se vyskytuje přirozeně tento mikroorganismus? Studentka odpověděla na všechny doplňující otázky členů komise, které byly v průběhu diskuse k dané problematice vzneseny. V diskusi studentka prokázala výbornou orientaci v dané problematice. Po diskusi následovalo hodnocení závěrečné práce. Studentka prokázala nejen výborné odborné znalosti, ale i schopnost samostatné prezentace dosažených výsledků.
Result of defence
práce byla úspěšně obhájena
Document licence
Standardní licenční smlouva - přístup k plnému textu bez omezení
DOI
Collections
Citace PRO