Metody stanovení hyaluronanu
Loading...
Date
Authors
ORCID
Advisor
Referee
Mark
A
Journal Title
Journal ISSN
Volume Title
Publisher
Vysoké učení technické v Brně. Fakulta chemická
Abstract
Tato bakalářská práce se zabývá souhrnem jednoduchých metod pro stanovení koncentrace hyaluronanu ve vodných roztocích a porovnává funkčnost jednotlivých vybraných metod, jako jsou UV-VIS spektroskopie, IČ spektroskopie a metoda stanovení pomocí alciánové modře. Tyto metody byly vybrány pro jejich jednoduchost a nízkou cenu. Jako nejspolehlivější z těchto tří, se jeví metoda IČ spektroskopie. Stanovení koncentrace HA touto metodou je v deionizované vodě u koncentrací nad 0,4 % poměrně přesné. U metody pomocí UV-VIS spektroskopie vychází kalibrační závislosti stanovení lineárně, ale stanovení nám neposkytuje charakteristickou informaci ve formě píku, to znamená, že by toto stanovení mohlo být lehce ovlivněno dalšími složkami vodného roztoku. Slabá iontová síla a molekulová hmotnost HA ale nemají na stanovení vliv. U metody pomocí alciánové modře byly výsledky značně nevyhovující a nekorespondující s literaturou. Proto tato metoda není v této podobě použitelná pro stanovení koncentrace HA. Další možnou variantou pro stanovení koncentrace HA je metoda ELISA. Jedná se o komerčně vyráběné kity, vhodné pro stanovování nízkých koncentrací v nízkých objemech. Jejich cena je ovšem vyšší než u výše zmíněných metod.
This thesis deals with of simple methods for determining the concentration of hyaluronan in aqueous solution and compares the performance of each selected methods such as UV -VIS spectroscopy, IR spectroscopy and the method of determination by alcian blue. These methods were chosen for their simplicity and low cost of the assay. As the most reliable of these three methods, seems to be the method of IR spectroscopy. Determination of the concentration of HA by this method is relatively accurate at concentrations above 0.4 % in deionized water. The method of UV-VIS spectroscopy is based on a linear calibration curve determination, but no characteristic peak was detected, which means that this determination could be influenced by other components of the aqueous solution. Weak ionic strength and molecular weight of HA does not affect the determination. In the method with alcian blue, the results were quite unsatisfactory and does not correspond with the literature. Therefore, this method is not applicable in this form for determining the concentration of HA. Another option for determining the concentration of the HA is ELISA method. These are commercially produced kits suitable for determining low concentrations in low volumes. Its price is higher than the above- mentioned methods.
This thesis deals with of simple methods for determining the concentration of hyaluronan in aqueous solution and compares the performance of each selected methods such as UV -VIS spectroscopy, IR spectroscopy and the method of determination by alcian blue. These methods were chosen for their simplicity and low cost of the assay. As the most reliable of these three methods, seems to be the method of IR spectroscopy. Determination of the concentration of HA by this method is relatively accurate at concentrations above 0.4 % in deionized water. The method of UV-VIS spectroscopy is based on a linear calibration curve determination, but no characteristic peak was detected, which means that this determination could be influenced by other components of the aqueous solution. Weak ionic strength and molecular weight of HA does not affect the determination. In the method with alcian blue, the results were quite unsatisfactory and does not correspond with the literature. Therefore, this method is not applicable in this form for determining the concentration of HA. Another option for determining the concentration of the HA is ELISA method. These are commercially produced kits suitable for determining low concentrations in low volumes. Its price is higher than the above- mentioned methods.
Description
Citation
ČERNÁ, L. Metody stanovení hyaluronanu [online]. Brno: Vysoké učení technické v Brně. Fakulta chemická. 2014.
Document type
Document version
Date of access to the full text
Language of document
cs
Study field
Chemie pro medicínské aplikace
Comittee
prof. Ing. Miloslav Pekař, CSc. (předseda)
prof. RNDr. Ivana Márová, CSc. (místopředseda)
prof. Ing. Oldřich Zmeškal, CSc. (člen)
prof. Ing. Michal Veselý, CSc. (člen)
doc. Ing. Pavel Diviš, Ph.D. (člen)
Date of acceptance
2014-06-16
Defence
Márová – která z v práci uvedených metod by byla pro analýzu nejvhodnější použití refraktometrického detektoru k měření koncentračních závislostí
Veselý – interakce kyseliny hyaluronové s alciánovou modří typ spektrometru pro měření absorpčních spekter změny absorbance při použití octanu sodného
Result of defence
práce byla úspěšně obhájena
Document licence
Standardní licenční smlouva - přístup k plnému textu bez omezení