Degradace biomateriálů v modelovém fyziologickém prostředí
Loading...
Date
Authors
ORCID
Advisor
Referee
Mark
A
Journal Title
Journal ISSN
Volume Title
Publisher
Vysoké učení technické v Brně. Fakulta chemická
Abstract
Cílem předložené práce je studium degradace vybraných modifikovaných bílkovinných materiálů a optimalizace metod použitelných pro sledování změn koncentrace proteinů ve vzorcích podléhajících proteolytické degradaci. V první části práce byla zpracována rešerše o biomateriálech používaných v biomedicínských aplikacích, biokompatibilitě, charakteru kolagenových materiálů a jejich použití. V rámci praktické části byly ověřeny vybrané metody sledování proteolýzy na kalibračních standardech hovězího sérového albuminu, kolagenu a vybraných aminokyselin. Součástí předložené práce bylo také sledování proteolýzy u vybraných modifikovaných kolagenových materiálů. V první fázi byly testovány vybrané metody stanovení celkových bílkovin: ninhydrinová, biuretová, Hartree-Lowryho, spektrofotometrie UV-VIS a metoda s využitím TNBS - trinitrobenzensulfonové kyseliny. Pro sledování proteolýzy byly upraveny dvě metody: biuretová metoda, detekuje peptidové vazby a metoda s TNBS, pomocí které lze detekovat primární aminoskupiny. Metody byly aplikovány na sledování proteolýzy u tří různých typů kolagenu degradovaných pomocí kolagenázy. U standardu rozpustného kolagenu a rovněž u modifikovaných kolagenů byl zaznamenán úbytek peptidových vazeb a přírůstek primárních aminoskupin úměrně koncentraci enzymu a poměru enzym : substrát. U nerozpustného kolagenu byla analýza výrazně ovlivněna strukturou a změnami konformace materiálu během degradace.
The aim of presented work was to study degradation of selected modified protein materials and optimization of methods usable for protein concentration changes in samples that undergo proteolytic degradation. In first part overview of biomaterials used in medicine applications, biocompatibility and of collagen materials and their applications was given. In experimental part some methods for proteolysis determination were tested using standards of albumin, collagen and selected amino acids. As a part of this work proteolysis of selected modified collagen materials was observed. First, following methods for total protein analysis were tested: ninhydrin method, biuret method, Hartree-Lowry, UV-VIS spectrophotometry and TNBS method (trinitro-benzen-sulphonic acid). For collagen proteolysis determination two of these methods were optimized: biuret method (peptide group detection) and TNBS (primary amino group detection). These two methods were applied on enzyme degradation of three collagen samples: soluble collagen standard, collagen standard type I (insoluble) and modified collagen material for clinical application. In soluble and modified collagens collagenase effect exhibited decrease of peptide bounds and, simultaneously, increase of primary amino groups according to enzyme concentration and enzyme:substrate ratio. In insoluble collagen analysis was strongly influenced by structure and conformation changes of material during degradation.
The aim of presented work was to study degradation of selected modified protein materials and optimization of methods usable for protein concentration changes in samples that undergo proteolytic degradation. In first part overview of biomaterials used in medicine applications, biocompatibility and of collagen materials and their applications was given. In experimental part some methods for proteolysis determination were tested using standards of albumin, collagen and selected amino acids. As a part of this work proteolysis of selected modified collagen materials was observed. First, following methods for total protein analysis were tested: ninhydrin method, biuret method, Hartree-Lowry, UV-VIS spectrophotometry and TNBS method (trinitro-benzen-sulphonic acid). For collagen proteolysis determination two of these methods were optimized: biuret method (peptide group detection) and TNBS (primary amino group detection). These two methods were applied on enzyme degradation of three collagen samples: soluble collagen standard, collagen standard type I (insoluble) and modified collagen material for clinical application. In soluble and modified collagens collagenase effect exhibited decrease of peptide bounds and, simultaneously, increase of primary amino groups according to enzyme concentration and enzyme:substrate ratio. In insoluble collagen analysis was strongly influenced by structure and conformation changes of material during degradation.
Description
Citation
MIKULÍKOVÁ, Z. Degradace biomateriálů v modelovém fyziologickém prostředí [online]. Brno: Vysoké učení technické v Brně. Fakulta chemická. 2008.
Document type
Document version
Date of access to the full text
Language of document
cs
Study field
Potravinářská chemie
Comittee
prof. Ing. Peter Šimko, DrSc. (předseda)
doc. Ing. Jiřina Omelková, CSc. (místopředseda)
prof. RNDr. Ivana Márová, CSc. (člen)
doc. Ing. Bohuslav Rittich, CSc. (člen)
doc.Ing.Jan Světlík, CSc. (člen)
Date of acceptance
2008-06-24
Defence
1. Studentka seznámila členy komise s náplní a cílem bakalářské práce.
2. Byly přečteny posudky na bakalářskou práci.
3. Studentka akceptovala všechny připomínky oponenta a na všechny otázky odpověděla v plné šíři.
4. Diskuse:
doc. Světlík: Proč se absorbance měří při tak nízkých koncentracích?
Result of defence
práce byla úspěšně obhájena
Document licence
Přístup k plnému textu prostřednictvím internetu byl licenční smlouvou omezen na dobu 3 roku/let