Biotechnologická produkce PHA pomocí extremofilních mikroorganismů
Loading...
Date
Authors
ORCID
Advisor
Referee
Mark
B
Journal Title
Journal ISSN
Volume Title
Publisher
Vysoké učení technické v Brně. Fakulta chemická
Abstract
Tato bakalářská práce se zabývá studiem produkce polyhydroxyalkanoátů (PHA) bakteriálním kmenem Halomonas salina (CCM 4361T). V teoretické části jsou zpracovány vlastnosti a biosyntéza PHA a charakteristika extremofilních bakterií. Experimentální část je zaměřena na kultivaci bakterie na různých substrátech a koncentracích soli v médiu pro optimální produkci PHA. Množství biomasy a PHA bylo analyzováno pomocí spektrofotometrické metody a plynové chromatografie s FID detekcí. Pro produkci PHA byla nejlepším substrátem vyhodnocena fruktóza, kdy bylo dosaženo 12,55% PHB v biomase. Optimální koncentrace NaCl byla dosažena při 80 g/l. Bakterie byla testována pomoci polymerázové řetězové reakce (PCR) a detekována gelovou elektroforézou. Testování prokázalo obsah phaC genu, který kóduje klíčový enzym biosyntézy PHA - PHA syntázu.
This bachelor thesis is focused on study of production of polyhydroxyalkanoates (PHA) by bacteria Halomonas salina (CCM 4361T). Theoretical part deals with the properties and biosynthesis of PHA and chracterization of extremophiles bacteria. The experimental part is focused on cultivation of bacteria on different substrates and concentration of sodium chloride in medium for optimal production of PHA. Content of biomass and PHA were analyzed by spektrofotometry and gass chromatography with FID. The fructose proved to be the most suitable substrate for a production of PHA, with a content of 12,55 % of PHA in biomass. Optimal concetration of NaCl was found at 80 g/l. Bacteria were investigated by molecular technique polymerase chain reaction (PCR) and detected by gel elctrophoresis. Test confrimed opresence of phaC gene encoding for PHA synthase, enzyme which is necessary for PHA biosynthesis.
This bachelor thesis is focused on study of production of polyhydroxyalkanoates (PHA) by bacteria Halomonas salina (CCM 4361T). Theoretical part deals with the properties and biosynthesis of PHA and chracterization of extremophiles bacteria. The experimental part is focused on cultivation of bacteria on different substrates and concentration of sodium chloride in medium for optimal production of PHA. Content of biomass and PHA were analyzed by spektrofotometry and gass chromatography with FID. The fructose proved to be the most suitable substrate for a production of PHA, with a content of 12,55 % of PHA in biomass. Optimal concetration of NaCl was found at 80 g/l. Bacteria were investigated by molecular technique polymerase chain reaction (PCR) and detected by gel elctrophoresis. Test confrimed opresence of phaC gene encoding for PHA synthase, enzyme which is necessary for PHA biosynthesis.
Description
Citation
KURZOVÁ, P. Biotechnologická produkce PHA pomocí extremofilních mikroorganismů [online]. Brno: Vysoké učení technické v Brně. Fakulta chemická. 2018.
Document type
Document version
Date of access to the full text
Language of document
cs
Study field
Biotechnologie
Comittee
prof. RNDr. Ivana Márová, CSc. (předseda)
doc. Ing. Pavel Diviš, Ph.D. (místopředseda)
doc. Ing. Stanislav Obruča, Ph.D. (člen)
RNDr. Renata Mikulíková, Ph.D. (člen)
doc. Mgr. Václav Brázda, Ph.D. (člen)
doc. Ing. Adriána Kovalčík, Ph.D. (člen)
Date of acceptance
2018-06-15
Defence
1. Studentka seznámila členy komise s náplní a cílem bakalářské práce.
2. Byly přečteny posudky na bakalářskou práci.
3. Studentka akceptovala všechny připomínky oponenta a na všechny otázky odpověděla v plné šíři.
Diskuse
prof. Márová: Byl testovaný kmen schopen využívat všechny monosacharidy a disacharidy?
doc. Diviš: Zmínila jste gen produkující PHA, co to znamená?
dr. Mikulíková: Jaké kultivační médium bylo vhodnější, sacharidové nebo lipidické?
doc. Brázda: Je sekvence pro gen phaC známá, liší se tato sekvence u různých kmenů?
doc. Kovalčík: Jak si vysvětlujete, že nevznikal indukovaný kopolymer? Byla sledována i životaschopnost buněk?
Result of defence
práce byla úspěšně obhájena
Document licence
Standardní licenční smlouva - přístup k plnému textu bez omezení