Využití magnetických částic při izolaci DNA z vybraných tepelně zpracovaných výrobků rostlinného původu

but.committeeprof. RNDr. Ivana Márová, CSc. (předseda) doc. RNDr. Alena Španová, CSc. (místopředseda) doc. Ing. Bohuslav Rittich, CSc. (člen) doc. Ing. Pavel Diviš, Ph.D. (člen) doc. Ing. Stanislav Obruča, Ph.D. (člen) RNDr. Renata Mikulíková, Ph.D. (člen)cs
but.defence1. Diplomantka seznámila členy komise s náplní a cílem diplomové práce. 2. Byly přečteny posudky na diplomovou práci. 3. Diplomantka akceptovala všechny připomínky oponenta a na všechny otázky odpověděla v plné šíři. Diskuse doc. Obruča: PCR enhancer ?cs
but.jazykčeština (Czech)
but.programChemie a technologie potravincs
but.resultpráce byla úspěšně obhájenacs
dc.contributor.advisorKovařík, Alešcs
dc.contributor.authorHronová, Anetacs
dc.contributor.refereeRittich, Bohuslavcs
dc.date.accessioned2019-05-17T06:14:53Z
dc.date.available2019-05-17T06:14:53Z
dc.date.created2017cs
dc.description.abstractDiplomová práce byla zaměřena na testování mikroizolace DNA za pomocí magnetických částic z tepelně zpracovaných potravinových výrobků v kvalitě vhodné pro polymerázovou řetězovou reakci (PCR). Pro analýzu byly vybrány rybízové džemy. Ty byly homogenizovány s použitím plastového kopistu a stomacheru v lyzačním roztoku s cetyltrimetylammonium bromidem (CTAB). Při přípravě homogenátů byl testován vliv chloroform-oktanolu a isopropanolu. Homogenáty byly použity pro izolaci DNA magnetickými částicemi. Po odstředění komplexů CTAB s proteiny, polyfenoly a polysacharidy byla hrubá frakce DNA purifikována vazbou na magnetické částice. Byly testovány dva druhy magnetických částic: mikročástice poly(hydroxyethylmethakrylát-co-glycidylmethakrylát) - P(HEMA-co-GMA) a nanočástice oxidů železa pokryté poly(L-lysinem) - PLL. Izolovaná DNA byla podrobena spektrofotometrické analýze, kde byla zjišťována její koncentrace a kontaminace polyfenoly a proteiny. Poté byla testována amplifikovatelnost DNA v PCR. Pro amplifikaci byly použity primery specifické pro rostlinnou ribosomální DNA. Produkty PCR s očekávanou délkou 700 bp byly detegovány agarózovou gelovou elektroforézou. Bylo zjištěno, že z džemů lze pomocí testovaných magnetických nosičů izolovat DNA v kvalitě vhodné pro PCR.cs
dc.description.abstractThe thesis has been focused on testing of micromethod of DNA isolation using magnetic particles from thermic-managed food products in a quality suitable for polymerase chain reaction (PCR). Currant jams were selected for the analysis. These were homogenized using plastic copist and stomacher in lysis buffer with cetyltrimethylammonium bromide (CTAB). The effect of chloroform-octanol and isopropanol in the preparation of homogenates was tested. Homogenates were used for DNA isolation by magnetic particles. Rough fraction of DNA was purified by binding on the magnetic particles after centrifugation of the CTAB complexes with proteins, polyphenols and polysaccharides. Two types of magnetic particles were tested: microparticles of poly(hydroxyethylmethacrylate-co-glycidylmethacrylate) - P(HEMA-co-GMA) and nanoparticles of iron oxides covered by poly(L-lysine) - PLL. Isolated DNA was analyzed spectrophotometrically - it was assessed its concentration and contamination by polyphenols and proteins. After that, amplification of the DNA was tested in PCR. Primers specific for plant ribosomal DNA were used. PCR products of expected length 700 bp were detected by agarose gel electrophoresis. It was shown that DNA isolated from currant jams using magnetic particles was in PCR-ready quality.en
dc.description.markAcs
dc.identifier.citationHRONOVÁ, A. Využití magnetických částic při izolaci DNA z vybraných tepelně zpracovaných výrobků rostlinného původu [online]. Brno: Vysoké učení technické v Brně. Fakulta chemická. 2017.cs
dc.identifier.other99550cs
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/11012/64811
dc.language.isocscs
dc.publisherVysoké učení technické v Brně. Fakulta chemickács
dc.rightsStandardní licenční smlouva - přístup k plnému textu bez omezenícs
dc.subjectizolace DNAcs
dc.subjectmagnetické mikročásticecs
dc.subjectmagnetické nanočásticecs
dc.subjectpolymerázová řetězová reakce (PCR)cs
dc.subjectisolation of DNAen
dc.subjectmagnetic microparticlesen
dc.subjectmagnetic nanoparticlesen
dc.subjectpolymerase chain reaction (PCR)en
dc.titleVyužití magnetických částic při izolaci DNA z vybraných tepelně zpracovaných výrobků rostlinného původucs
dc.title.alternativeThe application of magnetic particles for DNA isolation from thermally processed food productsen
dc.typeTextcs
dc.type.drivermasterThesisen
dc.type.evskpdiplomová prácecs
dcterms.dateAccepted2017-05-29cs
dcterms.modified2017-05-30-10:13:36cs
eprints.affiliatedInstitution.facultyFakulta chemickács
sync.item.dbid99550en
sync.item.dbtypeZPen
sync.item.insts2021.11.12 21:10:06en
sync.item.modts2021.11.12 20:03:52en
thesis.disciplinePotravinářská chemie a biotechnologiecs
thesis.grantorVysoké učení technické v Brně. Fakulta chemická. Ústav chemie potravin a biotechnologiícs
thesis.levelInženýrskýcs
thesis.nameIng.cs
Files
Original bundle
Now showing 1 - 2 of 2
Loading...
Thumbnail Image
Name:
final-thesis.pdf
Size:
2.21 MB
Format:
Adobe Portable Document Format
Description:
final-thesis.pdf
Loading...
Thumbnail Image
Name:
review_99550.html
Size:
6.83 KB
Format:
Hypertext Markup Language
Description:
review_99550.html
Collections