Anizotropní techniky ve studiu cytoplazmy
Loading...
Date
Authors
ORCID
Advisor
Referee
Mark
A
Journal Title
Journal ISSN
Volume Title
Publisher
Vysoké učení technické v Brně. Fakulta chemická
Abstract
Cílem této práce bylo provést srovnávací experimenty pomocí časově rozlišené anizotropie a ustálené anizotropie v bakteriích kmene Cupriavidus necator. Fluorescenční sondou pro skenování buněčného vzorku byl vybrán fluorescein, respektive jeho derivát BCECF_AM. Pomocí ověřovacího experimentu v systému glycerol/voda s přídavkem fluoresceinu, byla ověřena anizotropie a vypočítán molární hydrodynamický objem jedné molekuly fluoresceinu, který přibližně odpovídal jeho reálné hodnotě. Pomocí fluorescenční anizotropní mikroskopie byly získány obrázky bakterií s příslušnými středními hodnotami anizotropií. Skeny bakterií CN H16 a mutantů CN PHB-4, ukázaly patrné rozdíly mezi uniformitou vnitřního prostředí.
The main goal of this thesis was to compare experiments using time-resolved anisotropy and steady-state anisotropy for measuring in bacteria strain Cupriavidus necator. Fluorescent probe for anisotropy imaging was chosen BCECF_AM, which is derivate of fluorescein. Using experiment in system glycerol/water with fluorescein, anisotropy has been verified and calculated molecular hydrodynamic volume of a single fluorescein molecule, which approximately corresponded with real value. By using fluorescence imaging anisotropy microscopy, images and values of average anisotropy in cells were taken. Images of living cells (bacteria) of CN H16 and mutant CN PHB-4 showed differences, mainly in the uniformity of the inside environment.
The main goal of this thesis was to compare experiments using time-resolved anisotropy and steady-state anisotropy for measuring in bacteria strain Cupriavidus necator. Fluorescent probe for anisotropy imaging was chosen BCECF_AM, which is derivate of fluorescein. Using experiment in system glycerol/water with fluorescein, anisotropy has been verified and calculated molecular hydrodynamic volume of a single fluorescein molecule, which approximately corresponded with real value. By using fluorescence imaging anisotropy microscopy, images and values of average anisotropy in cells were taken. Images of living cells (bacteria) of CN H16 and mutant CN PHB-4 showed differences, mainly in the uniformity of the inside environment.
Description
Citation
SÝKOROVÁ, K. Anizotropní techniky ve studiu cytoplazmy [online]. Brno: Vysoké učení technické v Brně. Fakulta chemická. 2016.
Document type
Document version
Date of access to the full text
Language of document
cs
Study field
Spotřební chemie
Comittee
prof. Ing. Martina Klučáková, Ph.D. (předseda)
prof. Ing. Michal Veselý, CSc. (místopředseda)
prof. Ing. Ladislav Omelka, DrSc. (člen)
doc. Ing. František Šoukal, Ph.D. (člen)
doc. Mgr. Martin Vala, Ph.D. (člen)
Date of acceptance
2016-06-16
Defence
Klučáková – Vysvětlete pojem „limitní anizotropie“. Je výsledkem práce konkrétní doporučený postup měření, který bude nadále používán?
Omelka – Proč byl vybrán tento systém pro studium?
Šoukal – Vysvětlete pojem anizotropie obecně jak je používán ve vaší práci.
Vala – Neměla by být nejprve změřena fluorescenční mapa a teprve potom provedeno srovnání anizotropií? Je míra anizotropie závislá na množství fluoroforu?
Result of defence
práce byla úspěšně obhájena
Document licence
Standardní licenční smlouva - přístup k plnému textu bez omezení