Způsoby zpracování vody pro in vitro detekci endokrinních disruptorů
Loading...
Date
Authors
ORCID
Advisor
Referee
Mark
A
Journal Title
Journal ISSN
Volume Title
Publisher
Vysoké učení technické v Brně. Fakulta chemická
Abstract
V uplynulých letech vzrostl zájem o sledování estrogenních látek ve vodním prostředí kvůli jejich nepříznivým účinkům na zdraví lidí a dalších obratlovců. Zvláštní pozornost je věnována analytickým metodám používaným ke kvantifikaci těchto látek ve vzorcích vody. Tyto metody jsou instrumentální nebo biologické (in vitro, in vivo). Kvůli velmi nízkému množství estrogenů ve vodě (ng·l-1) a nízké mezi detekce analytických metod je potřeba tyto vzorky zakoncentrovat. K zakoncentrování vodných vzorků se dnes běžně používá extrakce na tuhou fázi (SPE) nebo kapalinová extrakce (LLE). Tato bakalářská práce představuje reverzní osmózu (RO) a nanofiltraci jako další možnou metodu prekoncentrace vodných vzorků. Práce je zaměřena na prekoncentraci obohacených vzorků vodovodní vody čtyřmi estrogeny – estronem (E1), 17-estradiolem (E2), estriolem (E3) a 17-ethynylestradiolem (EE2) – i vzorků povrchové vody ze tří brněnských toků pomocí RO a SPE a porovnání jejich účinnosti pomocí biotestu estrogenity na stabilně transfekované buněčné linii hER-HeLa-9903. Využitím RO byly estrogeny zakoncentrovány s různou výtěžností – nejvyšší výtěžnosti bylo dosaženo u EE2 129,29 %, nejnižší u E2 38,53 %. Ve vzorcích povrchové vody nebylo naměřené detekovatelné množství estrogenů. RO se jeví jako metoda použitelná pro prekoncentraci vodných vzorků před in vitro analýzou endokrinních disruptorů, je ovšem zapotřebí další optimalizace této metody. Vzorky zpracované metodou SPE nebyly do termínu odevzdání bakalářské práce změřeny, srovnání účinnosti RO a SPE tedy provedeno nebylo.
In recent years, interest in monitoring of estrogenic compounds in water environment due to their adverse effects on human and animal health has been increased. Partiucular attention is paid to analytical techniques used to quantify estrogens in water samples, such as instrumental and biological techniques (in vitro, in vivo). Water samples need to be concentrated due to very low estrogen levels (ng·L-1) and low limit of detection of used analytical methods. Solid phase extraction (SPE) or liquid-liquid extraction (LLE) are comonly used to concentrate water samples. This bachelor thesis represents reverse osmosis (RO) and nanofiltration (NF) as another possible methods for this purpose. This thesis is focused on the preconcentration of water samples spiked with four estrogens (estrone E1, 17-estradiol E2, estriol E3 and 17-ethynylestradiol EE2) and surface water samples taken from three watercourses in city of Brno using RO and SPE and its comparison of their effeciency. This was evaluated by in vitro estrogenicity assay on the stably transfected cell line hER-HeLa-9903. By using RO, estrogens were concentrated with different recovery – the highest recovery was reached for EE2 129.29%, lowest for E2 38.53%. No detectable amount of estrogen has been detected in surface water samples. RO appears to be a suitable method to the water samples preconcentration prior to in vitro analysis of endocrine disrupting compounds. Water samples treated by the SPE method were not measured untill the sunbmission of bachelor thesis, so the RO and SPE efficiency was not performed.
In recent years, interest in monitoring of estrogenic compounds in water environment due to their adverse effects on human and animal health has been increased. Partiucular attention is paid to analytical techniques used to quantify estrogens in water samples, such as instrumental and biological techniques (in vitro, in vivo). Water samples need to be concentrated due to very low estrogen levels (ng·L-1) and low limit of detection of used analytical methods. Solid phase extraction (SPE) or liquid-liquid extraction (LLE) are comonly used to concentrate water samples. This bachelor thesis represents reverse osmosis (RO) and nanofiltration (NF) as another possible methods for this purpose. This thesis is focused on the preconcentration of water samples spiked with four estrogens (estrone E1, 17-estradiol E2, estriol E3 and 17-ethynylestradiol EE2) and surface water samples taken from three watercourses in city of Brno using RO and SPE and its comparison of their effeciency. This was evaluated by in vitro estrogenicity assay on the stably transfected cell line hER-HeLa-9903. By using RO, estrogens were concentrated with different recovery – the highest recovery was reached for EE2 129.29%, lowest for E2 38.53%. No detectable amount of estrogen has been detected in surface water samples. RO appears to be a suitable method to the water samples preconcentration prior to in vitro analysis of endocrine disrupting compounds. Water samples treated by the SPE method were not measured untill the sunbmission of bachelor thesis, so the RO and SPE efficiency was not performed.
Description
Keywords
endokrinní disruptory, endokrinní disrupce, estrogeny, extrakce na tuhou fázi, reverzní osmóza, in vitro test, prekoncentrace vzorků, hER-HeLa-9903, endocrine disrupting compounds, endocrine disruption, estrogens, solid phase extraction, reverse osmosis, in vitro analysis, water samples preconcentration, hER-HeLa-9903
Citation
DANIEL, R. Způsoby zpracování vody pro in vitro detekci endokrinních disruptorů [online]. Brno: Vysoké učení technické v Brně. Fakulta chemická. 2018.
Document type
Document version
Date of access to the full text
Language of document
cs
Study field
Biotechnologie
Comittee
prof. RNDr. Ivana Márová, CSc. (předseda)
doc. Ing. Pavel Diviš, Ph.D. (místopředseda)
doc. Ing. Stanislav Obruča, Ph.D. (člen)
RNDr. Renata Mikulíková, Ph.D. (člen)
doc. Mgr. Václav Brázda, Ph.D. (člen)
doc. Ing. Adriána Kovalčík, Ph.D. (člen)
Date of acceptance
2018-06-14
Defence
1. Student seznámil členy komise s náplní a cílem bakalářské práce.
2. Byly přečteny posudky na bakalářskou práci.
3. Student akceptoval všechny připomínky oponenta a na všechny otázky odpověděl v plné šíři.
Diskuse
prof. Márová: Uvádíte, že buňky nespolupracovali, o jaké buňky se jednalo?
doc. Diviš: Doporučil bych oboustranný tisk práce a větší důraz na formátování práce, především přehlednější číslování kapitol.
dr. Mikulíková: Na kterých místech byly odebírány vzorky vody?
doc. Brázda: Jaká byla použita buněčná linie? Na jakou sekvenci DNA se váže estrogenový receptor? Je systém stabilní, jaký je princip?
doc. Kovalčík: Porovnával jste rozdíl mezi metodami RO a SPE, můžete blíže vysvětlit?
Result of defence
práce byla úspěšně obhájena
Document licence
Standardní licenční smlouva - přístup k plnému textu bez omezení