Vliv citrulinace histonových proteinů na genovou expresi vybraných genů u buněk myeloidní řady

but.committeeprof. Ing. Miloslav Pekař, CSc. (předseda) prof. RNDr. Ivana Márová, CSc. (místopředseda) doc. Ing. Pavel Diviš, Ph.D. (člen) doc. Ing. Petr Dzik, Ph.D. (člen) doc. Ing. Stanislav Obruča, Ph.D. (člen) prof. RNDr. Zbyněk Zdráhal, Dr. (člen)cs
but.defenceStudent prezentoval řešenou práci, její teoretická východiska a vlastní výsledky, zodpověděl dotazy položené oponentem a následně byly poleženy dotazy členů komise.Diviš: Prosím vysvětlete použité jednotky vašich odměrných roztoků? Jakým způsobem byl připraven a použit roztok „probemaster“?Márová: Kolik dárců krve jste použili pro studii? Jaká byla variabilita mezi vzorky? Jak jste ověřili, že dárci byli zdraví?Obruča: Proč jste si jistí, že použité aktivátory a inhibitory působí tak, jak očekáváte?Zdráhal: Prováděli jste kontrolu na proteinové úrovni? Student prokázal výbornou orientaci v dané problematice a schopnost samostatné prezentace získaných výsledků.cs
but.jazykčeština (Czech)
but.programChemie pro medicínské aplikacecs
but.resultpráce byla úspěšně obhájenacs
dc.contributor.advisorČíž,, Milancs
dc.contributor.authorTučková, Kristýnacs
dc.contributor.refereeDobeš,, Pavelcs
dc.date.accessioned2019-06-14T11:40:08Z
dc.date.available2019-06-14T11:40:08Z
dc.date.created2019cs
dc.description.abstractNeutrofilní granulocyty jsou důležitými buňkami vrozené imunity a zajišťují obranu organismu před patogeny pomocí různých mechanismů. Jedním z těchto mechanismů je NETóza, při které dochází k uvolnění dekondenzovaného chromatinu a také citrulinovaných histonových proteinů. Citrulinace je post-translační modifikací, která je katalyzována enzymem peptidylarginindeiminasou (PAD) a která vede k přeměně kladně nabitého argininu na neutrální citrulin a může způsobit změny exprese genů pro cytokiny. Byla stanovována koncentrace prozánětlivých cytokinů (IL-8, TNF, IL-1) v závislosti na míře citrulinace histonu H3. Stanovení bylo provedeno na úrovni proteinů metodou ELISA a na úrovni mRNA pomocí qPCR. Pro navození citrulinace a aktivaci PAD4 byl použit vápníkový ionofor a pro inhibici sloužily dva inhibitory: Cl-amidine a TDFA. Bylo zjištěno, že po aktivaci PAD4 docházelo k významnému zvýšení produkce IL-8 a IL-1. Zvýšení exprese IL-8 bylo rovněž potvrzeno i na úrovni mRNA pomocí qPCR. K inhibici PAD4 a snížení produkce IL-8 a IL-1 docházelo za použití obou inhibitorů. Expresi TNF se nepodařilo prokázat ani na úrovni proteinů, ani na úrovni mRNA.cs
dc.description.abstractNeutrophils are major cell type of innate immunity, that can eliminate pathogens by different mechanisms. One of these mechanisms is called NETosis, which leads to release of decondensed chromatin and citrullinated histone proteins. Citrullination is post-translational modification catalysed by peptidylarginine deiminase (PAD) and causing transformation of possitively charged arginin to neutral citrullin and can change expression of cytokine genes. Concetrations of pro-inflammatory cytokines (IL-8, TNF, IL-1) were measured after activation of PAD4 and induction of citrullination. Calcium ionophore was used to induce citrullinaton, Cl-amidine and TDFA were used as inhibitors. Production of cytokines was assessed by ELISA on protein level and by qPCR on mRNA level. It was found that induction of citrullination led to increased concentrations of IL-8 and IL-1. Elevated gene expression of IL-8 was confirmed on mRNA level. Both inhibitors were able to decrease level of histone H3 citrullination and IL-8 and IL-1 concentrations. Expression of TNF was not detected on protein and mRNA level.en
dc.description.markAcs
dc.identifier.citationTUČKOVÁ, K. Vliv citrulinace histonových proteinů na genovou expresi vybraných genů u buněk myeloidní řady [online]. Brno: Vysoké učení technické v Brně. Fakulta chemická. 2019.cs
dc.identifier.other117464cs
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/11012/177494
dc.language.isocscs
dc.publisherVysoké učení technické v Brně. Fakulta chemickács
dc.rightsStandardní licenční smlouva - přístup k plnému textu bez omezenícs
dc.subjectCitrulinacecs
dc.subjectHiston H3cs
dc.subjectNeutrofilcs
dc.subjectCytokinycs
dc.subjectPeptidylarginindeiminasacs
dc.subjectCitrullinationen
dc.subjectHistone H3en
dc.subjectNeutrophilen
dc.subjectCytokinesen
dc.subjectPeptidylarginine deiminaseen
dc.titleVliv citrulinace histonových proteinů na genovou expresi vybraných genů u buněk myeloidní řadycs
dc.title.alternativeInfluence of the citrulination of histon proteins on the expression of selected genes in myeloid cellsen
dc.typeTextcs
dc.type.drivermasterThesisen
dc.type.evskpdiplomová prácecs
dcterms.dateAccepted2019-05-27cs
dcterms.modified2019-05-29-08:21:55cs
eprints.affiliatedInstitution.facultyFakulta chemickács
sync.item.dbid117464en
sync.item.dbtypeZPen
sync.item.insts2021.11.08 13:06:43en
sync.item.modts2021.11.08 12:44:37en
thesis.disciplineChemie pro medicínské aplikacecs
thesis.grantorVysoké učení technické v Brně. Fakulta chemická. Ústav fyzikální a spotřební chemiecs
thesis.levelInženýrskýcs
thesis.nameIng.cs
Files
Original bundle
Now showing 1 - 2 of 2
Loading...
Thumbnail Image
Name:
final-thesis.pdf
Size:
1.56 MB
Format:
Adobe Portable Document Format
Description:
final-thesis.pdf
Loading...
Thumbnail Image
Name:
review_117464.html
Size:
9 KB
Format:
Hypertext Markup Language
Description:
review_117464.html
Collections